产品货号:
GS1528
中文名称:
通用型蛋白沉淀试剂
英文名称:
Universal Protein Sediment Reagent
产品规格:
100T
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品可以将低至浓度为1ng/mL的蛋白质溶液浓缩为小体积,在浓缩的过程中,几乎可以去除决大部分去污剂,变性剂和其它实验室常用试剂,如果按照实验步骤正确操作,蛋白质(MW>20kDa)的回收效率接近100%,对于5kDa到20kDa蛋白,回收效率接近90%。回收的蛋白质可以用于电泳,蛋白定量,纯化等,但是蛋白质的活性会丧失,整个操作可以在1h内完成,本试剂可以使用100次。
- 可以浓缩低至1ng/mL的蛋白质溶液,浓缩样品体积可以减少至原体积的5%。
- 可以去除非蛋白的去污试剂、还原试剂、螯合试剂、Tris、糖、尿素、硫尿及两性电解质等杂质。
- 蛋白质的回收效率达到90%,分子量大于20kDa的蛋白质回收效率更是接近100%。
- 回收的蛋白质可以用BCA法或Bradford法对蛋白质进行定量,以减少干扰物质对蛋白质定量准确性的影响。
组分 | 规格 |
沉淀试剂一 | 30mL |
沉淀试剂二 | 30mL |
保存:室温,有效期2年。
- 产品中的保存条件及有效期均以未开封情况下计算,为了防止产品与空气接触发生化学反应影响产品性能,将未使用完毕的组分按存储要求保存同时建议开封后的组分尽快使用完毕。
- 沉淀量一般不要超过100μg,对于重量大于50μg以上的蛋白质团块,可能需要的溶解时间比较长,用枪头将蛋白质团块捣碎可以加速蛋白质的溶解。
- 如果将蛋白质团块溶解于Laemmeli Buffer或其它蛋白质Loading Buffer中,请用1M的NaOH调节溶液的pH值,使蛋白质溶液从黄色变为蓝色后再进行上样电泳。
- 沉淀试剂一具有腐蚀性和刺激性,请在通风橱中使用,并做好防护措施。
- 使用后,请旋紧瓶盖防止溶液挥发和与空气中的物质发生化学反应。
- 本试剂盒只能够用于体外实验,不能够用于临床、治疗和动物体内实验等,由此产生的后果,概不承担责任。
- 将1倍体积的蛋白质溶液(通常50~100μL)与3倍体积的沉淀试剂一在EP管中相混合,涡旋振荡30sec,冰上或4℃静置10~15min。
- 再向EP管中加入3倍样品溶液体积的沉淀试剂二,涡旋振荡30sec,冰上或4℃静置10~15min。
- 转置冷冻离心机,于4℃,20000g (15000rpm)离心15min,这样会在EP管的底部,形成可见或不可见的紧密的蛋白质沉淀团块。一旦离心结束,尽快将EP管从离心机上取出,用枪头尽可能去除上清并保留沉淀。
- 离心结束后,立即去除上清,否则时间久了,蛋白质团块会慢慢扩散到溶液中,同时变小;离心时在EP管上做好记号,以便了解蛋白质团块在离心结束后,其在EP管底部的方位,使得在转移上清的过程中,更方便地在不接触到蛋白质团块的同时吸取上清以减少蛋白质的损失。
- 将试管倒置在滤纸上,以便让试管中的残液流干。
- 为减少沉淀试剂的残留,可以加入6倍样品体积的乙醇和乙醚的混合液(1:1 V/V)振荡后,4℃放置10min,再4℃,12830g (12000rpm)离心15min,去上清,保留沉淀。
- 根据实验的需要,将蛋白质沉淀溶解于合适的缓冲液中继续后续实验操作及分析。
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